【摘要】 目的 建立测定盐酸多巴酚丁胺注射液中盐酸多巴酚丁胺的含量的HPLC方法。方法 采用ODS柱，流动相为乙腈-磷酸盐缓冲溶液（取磷酸铵2.75 g,加水950 ml,用磷酸调节pH值至2.4,补水至1000 ml,摇匀）（梯度洗脱）；检测波长282 nm,流速1.0 ml/min,柱温30℃。结果 盐酸多巴酚丁胺的在浓度93.4~934 μg/ml与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率为99.9%,RSD为0.11%。结论 所建立的方法简便易行，准确可靠，可用于盐酸多巴酚丁胺注射液中盐酸多巴酚丁胺的含量测定。

　　中国论文网 http://www.xzbu.com/6/view-2530224.htm【关键词】盐酸多巴酚丁胺；高效液相色谱；梯度洗脱Determination of Dobutamine Hydrochloride in Dobutamine Injectionby HPLC【Abstract】 Objective To establish a HPLC method for determination of dobutamine hydrochloride in dextrose injection.Methods An ODS column was used with the mobile phase of acetonitride-phosphate buffer（Dissolve 2.75 g of phosphate amine in 950 ml of water.Adjust the solution with phosphoric acid to a pH of 2.4,dilute with water to 1000 ml,and mix.），gradient elution,at the detection wavelength of 282 nm and flow rate of 1.0 ml/min,and the column temperature was 30℃。Results The calibration curves of dobutamine hydrochloride was linear in the range of 93.4~934 μg/ml.The average recovery was 99.9%（RSD 0.11%）。Conclusion This method is accurate,sensitive and reproducible.It can be used for the dobutamine hydrochloride assay in dobutamine injection.

　　【Key words】Dobutamine hydrochloride; HPLC; Gradient elution作者单位：415500湖南省澧县人民医院药剂科盐酸多巴酚丁胺属β肾上腺素受体激动药，用于治疗各种不同原因引起的心肌收缩力衰弱的心衰，如冠心病引起的急性心肌梗死泵衰竭，扩张型心肌病，风湿性瓣膜病引起的心衰，心脏直视手术后所致的低排血量综合征以及难治性心力衰竭等[1,2]。目前对多巴酚丁胺含量测定的报道比较少，中国药典2000年版二部曾收载本品，采用非水滴定法测定本品的含量[3]。为了有效控制盐酸多巴酚丁胺注射液的质量，我们参考有关文献[4,5]并改进，通过实验摸索，运用HPLC法对盐酸多巴酚丁胺注射液中盐酸多巴酚丁胺进行测定，现报告如下。

　　1 仪器与试药Waters-2690及其色谱工作站（美国Waters），配备紫外检测器。UV-2550紫外可见分光光度计（日本岛津）盐酸多巴酚丁胺对照品（D-060102,含量99.2%,上海紫源制药有限公司）；盐酸多巴酚丁胺注射液[20 mg/2 ml（按多巴酚丁胺计），湖南中南科伦药业有限公司，批号：070921、070922、070923]。

　　2 方法与结果2.1 色谱条件 色谱柱Waters Symmetry C18（5 μm 4.6×250 mm），以乙腈为流动相A,以磷酸盐缓冲溶液（取磷酸铵2.75 g,加水950 ml,用磷酸调节pH值至2.4,补水至1000 ml,摇匀）为流动相B,梯度洗脱（梯度洗脱方式见表1）；流速1.0 ml/min;检测波长282 nm;进样量10 μl,柱温30℃。

　　表1梯度洗脱时间表时间（min）流动相A（%）流动相B（%）0168410356510~2535652.2 溶液配制2.2.1 对照品溶液 精密称取对盐酸多巴酚丁胺照品适量置50 ml量瓶中，加水适量溶解并稀释成0.4 mg/ml的对照品溶液。

　　2.2.2 供试品溶液 精密量取本品2 ml,置25 ml量瓶中，加水定容，摇匀，即得。

　　2.2.3 空白样品溶液 按本品处方，制备成缺盐酸多巴酚丁胺的阴性样品，然后按“2.2.2”项下方法制备成阴性样品溶液。

　　2.3 系统适用性试验 分别取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液各10 μl进样测定，在“2.1”项下色谱条件下，其他物质对盐酸多巴酚丁胺无影响，分离度>1.5,按盐酸多巴酚丁胺计理论塔板数>5000,典型色谱图见图1,空白辅料不干扰测定。

　　A对照品 B阴性对照品C样品图1 盐酸多巴酚丁胺HPLC图2.4 线性关系考察 以水为溶剂，分别配制对盐酸多巴酚丁胺照品浓度（C）为每1 ml中含93.41、186.82、280.23、373.64、467.10、560.46、747.28、934.10 μg的溶液分别进样，以浓度C对峰面积A进行回归，得的盐酸多巴酚丁胺线性方程为A=-77.31+16.23C,r=0.9999。结果表明：本品在93.4~934.1 μg/ml浓度范围内A与C成良好的线性关系。

　　2.5 稳定性试验 精密吸取同一批供试品溶液分别于0、1、2、4和8 h进样，测得含量的RSD为0.45%,表明供试品溶液在8 h内稳定。

　　2.6 精密度试验 取同一批供试品溶液连续进样6次，测得盐酸多巴酚丁胺含量的RSD为0.17%。

　　2.7 重复性取同一批号样品6份，按“2.2.2"项下制成供试品溶液，进样测得盐酸多巴酚丁胺含量的RSD为0.25%。

　　2.8 加样回收试验 按处方量，精密称取含对照品适量，用含有辅料的水溶液配制成高、中、低三种浓度的溶液，进样测定，测得盐酸多巴酚丁胺的平均回收率为100.2%,RSD为0.68%。

　　表2盐酸多巴酚丁胺的回收试验（n=6）编号加入量？（mg）测得量？（mg）回收率？（%）平均回收？率（%）RSD?（%）116.1816.0999.4215.8615.98100.8316.0416.11100.4420.0820.22100.7520.1620.0199.3100.20.68619.9020.06100.8723.8224.02100.8824.0423.8899.3923.8824.01100.52.9 样品测定 分别取对照品溶液和供试品溶液进样测定，按外标法以峰面积计算得盐酸多巴酚丁胺的含量，结果见表3。

　　表3样品测定结果（n=3）批号标示量（%）060720C0198.2060720C0298.4060720C0398.93 讨论3.1 检测波长的选择 经紫外扫描，盐酸多巴酚丁胺在282 nm波长附近有较大吸收，故本实验选择282 nm为检测波长。

　　3.2 流动相的选择 曾参考文献[4]使用反相离子对试剂进行分析，但由于其流动相组分多、费用高，处理时间长，且分析完成后色谱柱需清洗较长时间。在预试验时曾用乙腈-磷酸盐缓冲溶液分别为16:84、20:80、30:70、40:60等不同配比的流动相测定，盐酸多巴酚丁胺与5-羟甲基糠醛、中间体4-4-羟苯基-2-丁酮、盐酸多巴胺及其他辅料达不到分离要求。而采用本文的梯度洗脱，能实现有效分离。

　　参 考 文 献[1] 陈孝治。药物处方手册。湖南科学技术出版社：444-445.

　　[2] 刘国树。非洋地黄类正性肌力药物的临床应用现状。中华心血管病杂志，2002,30（8）：510-512.

　　[3] 中国药典。二部，2000:592-593.

　　[4] 陈桂良，余琛，张慧。盐酸多巴酚丁胺及有关物质的反相离子对HPLC法测定。中国医药工业杂志，2001,32（7）：307-309.

　　[5] 王贵法，黄萍。盐酸多巴酚丁胺葡萄糖注射液制备工艺研究。中国药业，2003,12（9）：43-44.